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冷凍保存細(xì)胞之方法？
人食管平滑肌細(xì)胞 HumanEsophageal:NormalEsophagealSmoothMuscleCells冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
本公司提供的細(xì)胞都是現(xiàn)貨供應(yīng)，詳細(xì)人食管平滑肌細(xì)胞 HumanEsophageal:NormalEsophagealSmoothMuscleCells說明書！

人食管平滑肌細(xì)胞 HumanEsophageal:NormalEsophagealSmoothMuscleCells

     產(chǎn)品描述：人食道平滑肌細(xì)胞提取于人食道組織，平滑肌的主要功能是負(fù)責(zé)空腔臟器的收縮，如、胃腸道、膀胱以及子宮等器官。它的結(jié)構(gòu)與骨骼肌有很大的不同。人食管壁包括三層，外縱形和內(nèi)環(huán)形，中間肌層是黏膜層。人食管的蠕動(dòng)是由嚴(yán)格控制。公司提供的人食管平滑肌原代細(xì)胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)人食管平滑肌原代細(xì)胞的組織采集于地方醫(yī)院，組織的采集根據(jù)公司批準(zhǔn)的方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司專利產(chǎn)品人食管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒(HumanEsophagealPrimaCell:NormalEsophagealSmoothMuscleCellsCatNo.3-0148)來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件，以降低雜細(xì)胞（如脂肪細(xì)胞、纖維細(xì)胞等）的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，人食管平滑肌原代細(xì)胞可以保持原代細(xì)胞的分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和。
      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。科技提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右完全培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項(xiàng)；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于。

【培養(yǎng)指南】
人食管平滑肌細(xì)胞 HumanEsophageal:NormalEsophagealSmoothMuscleCells對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
【細(xì)胞凍存】
待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行產(chǎn)品名稱凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走)，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KM9801 人脈絡(luò)膜細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL紫花前胡苷（標(biāo)準(zhǔn)品）Nodakenin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

滋養(yǎng)層細(xì)胞培養(yǎng)基TM-prf紫蓳靈（標(biāo)準(zhǔn)品）Corynoline質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

EPO Others Mouse 小鼠 Erythropoietin / EPO 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 紫云英苷（標(biāo)準(zhǔn)品）Astragaline質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

大鼠上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL棕櫚酸（標(biāo)準(zhǔn)品）Palmitic acid質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

CV-1細(xì)胞，非洲綠猴腎細(xì)胞 HPAC(人*癌細(xì)胞) CM-H010人小氣道上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL王不留行黃酮苷（標(biāo)準(zhǔn)品）Vaccarin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

CL-0289MDA-MB-435(人癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞)5×106cells/瓶×2甘丙肽，大鼠Galanin, rat質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

TT細(xì)胞，髓性細(xì)胞 人成巨核細(xì)胞細(xì)胞,MEG-01細(xì)胞 人急性淋巴母細(xì)胞性細(xì)胞;MOLT-4甘丙肽(1-13)-神經(jīng)肽Y(25-36)酰胺(M32)Galanin (1-13)-Neuropeptide Y(25-36), amide (M32)質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

4T1(小鼠癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2甘丙肽信號(hào)關(guān)聯(lián)肽（1-41）酰胺；Preprogalanin(65-105)酰胺Galanin Message Associated Peptide (1-41), amide; Preprogalanin(65-105), amide質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

MME Others Human 人 CD10 / MME / Neprilysin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 胃泌素Ⅰ（1-14），人Gastrin I (1-14) (human)質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

人胚皮膚成纖維細(xì)胞;CCC-ESF-1胃泌素釋放肽，人Gastrin Releasing Peptide,human質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

ACE2 Others Cynomolgus 食蟹猴 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 噻螨酮標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=6%)質(zhì)量規(guī)格：10μg/ml,u=6%Hexythiazox solution

CL-0213SK-MES-1(人肺鱗癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2抑霉唑標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=2%)質(zhì)量規(guī)格：100μg/ml,u=2%Imazalil solution

NCI-H446細(xì)胞，小細(xì)胞 人血液細(xì)胞,TF-1細(xì)胞 人肺巨細(xì)胞癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株;PG-BE1三氧化二鉻(>99%，BR)質(zhì)量規(guī)格：>99%，BRChromium (III) oxide

A549(人非小細(xì)胞細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2四氧化三鈷(>99%，BR)質(zhì)量規(guī)格：>99%，BRCobalt (II, III ) oxide

CSF2 Others Human 人 GM-CSF / CSF2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 乙酸鈷四水(>99.5%,BR)質(zhì)量規(guī)格：>99.5%,BRCobaltous acetate, tetrahydrate

人食管平滑肌細(xì)胞 HumanEsophageal:NormalEsophagealSmoothMuscleCellsPECAM1 Others Human 人 CD31 / PECAM1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 對(duì)羥基苯乙酰胺（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：供檢查用4-Hydroxyphenylacetamide

小氣道上皮細(xì)胞生長添加物SAEpiCGS奮乃靜（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：含量測定Prochlorperazine

MIF Others Human 人 MIF / GLIF 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 奮乃靜質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRProchlorperazine

CRFK 貓腎上皮細(xì)胞TGX221質(zhì)量規(guī)格：>98%,特異性的p110β抑制劑TGX-221

T-111B木瓜蛋白酶(含100mL酶解緩沖液)10mL地奧司明質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥90%,BRDiosimin

【復(fù)蘇的原則】
快速融化：必須將凍存在-196℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃，使細(xì)胞外凍存時(shí)的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時(shí)進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶，對(duì)細(xì)胞造成損害。復(fù)旦細(xì)胞庫全國各地均可發(fā)貨，全國統(tǒng)一價(jià)格，本公司出售的所有細(xì)胞僅供科研使用。