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產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 上海莼試 |
貨號 | CS-X0334 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
英文名稱 | 1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶 |
保質(zhì)期 | 詳見說明書個月 |
產(chǎn)品名稱:小鼠雜交瘤細胞,SDOW-17細胞規(guī)格
規(guī)格 :1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶
細胞特性
1)形態(tài):懸浮生長
2)含量:>1x106 個/mL
3)污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
4)規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
小鼠雜交瘤細胞,SDOW-17細胞規(guī)格細胞接受后的處理:
1)收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2)請先在顯微鏡下確認(rèn)細胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
4)如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
5)接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉寐?lián)系。
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備DMEM培養(yǎng)基(DMEM,GIBCO,貨號11965-092),90%;胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,先要消化處理并進行細胞計數(shù)。消化方法按照細胞傳代方法的1-3步驟進行,*的重懸液使用血清。懸浮細胞直接計數(shù)后離心,用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。
1.一般客戶拿到細胞后,應(yīng)該注意什么?
客戶收到細胞先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞時的培養(yǎng)基拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費發(fā)送一株細胞。
收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。
小鼠雜交瘤細胞,SDOW-17細胞規(guī)格細胞出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
(1)客戶造成細胞污染,不重發(fā);
(2)客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(3)非推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(4)細胞狀態(tài)不好,未提供細胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
(5)細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
(6)細胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);
(7)視具體情況而定。
CCL6 Protein Mouse 重組小鼠 CCL6 / C-C motif ligand 6 蛋白 (His 標(biāo)簽)
人腎管狀上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL
CD38 Others Rat 大鼠 SCARB3 人細胞裂解液 (陽性對照)
B16F1細胞,小鼠細胞 MRC-5(胚肺細胞) Asp2人胚胎腎細胞轉(zhuǎn)化細胞;FC33
穩(wěn)定表達EBNA1的人胚腎細胞;293E
Sf-9(昆蟲細胞) 5×106cells/瓶×2 人 Ierferon alpha-B / IFNA8 人細胞裂解液 (陽性對照)
tTA基因修飾的小鼠*癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-4C5
CCL20 Others Mouse 小鼠 CCL20 / MIP-3 alpha 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
CM-M096小鼠表皮角質(zhì)形成細胞完全培養(yǎng)基100mL
A-375 [A375], 人惡性黑素瘤細胞株 細胞,U-937細胞 NCI-N87(人細胞)
小鼠原B細胞株;BaF3
TNFSF13B Others Human 人 BAFF / TNFSF13B 人細胞裂解液 (陽性對照)
CCL6 Protein Mouse 重組小鼠 CCL6 / C-C motif ligand 6 蛋白 (His 標(biāo)簽)
人腎管狀上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL
CD38 Others Rat 大鼠 SCARB3 人細胞裂解液 (陽性對照)
B16F1細胞,小鼠細胞 MRC-5(胚肺細胞) Asp2人胚胎腎細胞轉(zhuǎn)化細胞;FC33
穩(wěn)定表達EBNA1的人胚腎細胞;293E
Sf-9(昆蟲細胞) 5×106cells/瓶×2 人 Ierferon alpha-B / IFNA8 人細胞裂解液 (陽性對照)
BileLactoseMedium
匹克氏肉湯基礎(chǔ) 100(g) incubation media 匹克氏肉湯基礎(chǔ) 100(g)
我妻氏血瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ) Wagstsuma Agar Base 250克 用于副溶血性弧菌的溶血試驗
DG-250用于食品中霉菌和酵母菌分離培養(yǎng)(Acumedia方法)incubationmediaDG-250用于食品中霉菌和酵母菌分離培養(yǎng)(Acumedia方法)
大豆胰酪蛋白胨肉湯(含亞鐵) 250g 用于沙門氏菌增菌培養(yǎng)
O157顯色培養(yǎng)基/大腸桿菌O157顯色培養(yǎng)基/O157 Chromogenic Medium 用于大腸桿菌O157菌的顯色培養(yǎng) 1升 國產(chǎn)/進口
NZYM肉湯/NZYM Broth BR 100克 國產(chǎn)/進口
NZYM瓊脂/NZYM Agar BR 100克 國產(chǎn)/進口
NZM肉湯/NZM Broth BR 100克 國產(chǎn)/進口
小鼠雜交瘤細胞,SDOW-17細胞規(guī)格革蘭氏陰性菌(G-)選擇性培養(yǎng)基250g用于革蘭氏陰性菌的選擇性培養(yǎng)
50320 可溶性淀粉 BR 500g incubation media 50320 可溶性淀粉 BR 500g
海棗曲霉 電工電子產(chǎn)品試用菌。 支/瓶
HB-PETAutoExpressMedium
沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(含氯霉素) 250g 用于真菌的分離培養(yǎng)