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產(chǎn)品名稱(chēng)：小鼠胚胎干細(xì)胞，SOX1-GFP細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
規(guī)格 ：1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶
細(xì)胞特性
1） 來(lái)源：小鼠胚胎干細(xì)胞，SOX1-GFP細(xì)胞

2） 含量：>1x106 個(gè)/mL

3） 污染：支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)為陰性

4） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

小鼠胚胎干細(xì)胞，SOX1-GFP細(xì)胞說(shuō)明書(shū)細(xì)胞接受后的處理：
1）收到細(xì)胞后，請(qǐng)檢查是否漏液，如果漏液，請(qǐng)拍照片發(fā)給我們。
2）請(qǐng)先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3）棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
4）如果細(xì)胞長(zhǎng)滿(mǎn)（90%以上）請(qǐng)及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代，傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
5）接到細(xì)胞次日，請(qǐng)檢查細(xì)胞是否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請(qǐng)及時(shí)與我們?nèi)〉寐?lián)系。
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備DMEM培養(yǎng)基(DMEM，GIBCO，貨號(hào)11965-092)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細(xì)胞的培養(yǎng)基終止消化。

3.輕輕吹打后吸出，移入15ml離心管中，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。

4.移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，先要消化處理并進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。消化方法按照細(xì)胞傳代方法的1-3步驟進(jìn)行，*的重懸液使用血清。懸浮細(xì)胞直接計(jì)數(shù)后離心，用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。
1.一般客戶(hù)拿到細(xì)胞后，應(yīng)該注意什么？
客戶(hù)收到細(xì)胞先不開(kāi)蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后（看細(xì)胞密度而定）在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議受收細(xì)胞時(shí)的培養(yǎng)基拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細(xì)胞100X，200X各一張），排除細(xì)胞本身污染的情況；收到細(xì)胞未開(kāi)封，出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。
收到細(xì)胞時(shí)如無(wú)異常情況，請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過(guò)80%匯合度時(shí)，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過(guò)80%匯合度時(shí)，請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。
CCL15 Protein Human 重組人 CCL15 / MIP-5 / MIP-1 delta 蛋白 (aa 46-113, His 標(biāo)簽)

人肝動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL

CCDC47 Others Human 人 CCDC47 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

P815細(xì)胞，小鼠肥大細(xì)胞癌細(xì)胞 V79-4(中國(guó)倉(cāng)鼠肺細(xì)胞) 非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-C;Vero-HCV-C

人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;COLO 320DM [COLO320DM]

QGY-7701(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠 EphA3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
豹貓肺成纖維樣細(xì)胞;LCL4

12. 骨骼細(xì)胞系統(tǒng)

CL-0107HGC-27(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T3-Swiss albino 大鼠角膜上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL

K562/Adr 人阿霉素耐藥株

IL10 Others Human 人 IL10 / Ierleukin-10 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
CCL15 Protein Human 重組人 CCL15 / MIP-5 / MIP-1 delta 蛋白 (aa 46-113, His 標(biāo)簽)

人肝動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL

CCDC47 Others Human 人 CCDC47 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

P815細(xì)胞，小鼠肥大細(xì)胞癌細(xì)胞 V79-4(中國(guó)倉(cāng)鼠肺細(xì)胞) 非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-C;Vero-HCV-C

人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;COLO 320DM [COLO320DM]

QGY-7701(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠 EphA3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
小腸耶爾森氏菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基

葡萄糖銨培養(yǎng)基 Ammonium Dextrose Medium 用于志賀氏菌的葡萄糖銨試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn))

豬去氧膽酸 Hyodeoxycholic acid 10克 BR，98%

MC培養(yǎng)基250g/瓶用于乳酸菌平板計(jì)數(shù)，每培養(yǎng)基中添加制成改良MC培養(yǎng)基incubationmediaMC培養(yǎng)基250g/瓶用于乳酸菌平板計(jì)數(shù)，每培養(yǎng)基中添加制成改良MC培養(yǎng)基

現(xiàn)隱肉湯 250g 用于水中大腸菌群計(jì)數(shù)(US-EPA方法)
布氏菌選擇性培養(yǎng)基/Brucella Selective Medium  布氏菌的選擇性分離培養(yǎng)  250克  國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

/波爾頓肉湯/Bolton Selective Enrichment Broth  彎曲桿菌的選擇性增菌培養(yǎng)  250克  國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

鹽發(fā)酵管  BR  20支  國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

培養(yǎng)基/鹽培養(yǎng)基/Malonate Broth  用于測(cè)定腸道細(xì)菌對(duì)鹽的利用試驗(yàn)  10克  國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
小鼠胚胎干細(xì)胞，SOX1-GFP細(xì)胞說(shuō)明書(shū)AntibioticAgar

乳糖膽鹽培養(yǎng)基 1000(g) incubation media 乳糖膽鹽培養(yǎng)基 1000(g)

科瑪嘉大腸桿菌顯色培養(yǎng)基 1000ml/瓶

GC瓊脂250用于淋球菌的分離培養(yǎng)(OXOID方法)incubationmediaGC瓊脂250用于淋球菌的分離培養(yǎng)(OXOID方法)

CHOMediumBase
小鼠胚胎干細(xì)胞，SOX1-GFP細(xì)胞說(shuō)明書(shū)細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題，不予以重發(fā)的情況有哪些？
（1）客戶(hù)造成細(xì)胞污染，不重發(fā)；
（2）客戶(hù)不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
（3）非推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
（4）細(xì)胞狀態(tài)不好，未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā)；
（5）細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的，不重發(fā)；
（6）細(xì)胞收到2天內(nèi)，未告知，不重發(fā)；
（7）視具體情況而定。