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產地 | 進口、國產 |
品牌 | 上海莼試 |
貨號 | CS-X0224 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
英文名稱 | 1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶 |
保質期 | 詳見說明書個月 |
產品名稱:人體*細胞系,HEK-293T細胞圖片
規(guī)格 :1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶
細胞特性
1) 來源:胚胎
2) 形態(tài):貼壁生長;懸浮生長(使用專用懸浮培養(yǎng)基,細胞呈懸浮生長狀態(tài);使用MEM-EBSS + NEAA + 10%FBS培養(yǎng)基時,細胞呈貼壁生長狀態(tài))
3) 含量:>1x106 個/mL
4) 污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
人體*細胞系,HEK-293T細胞圖片細胞接受后的處理:
1)收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2)請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
4)如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
5)接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發(fā)現污染或疑似污染,請及時與我們取得聯系。
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備基礎培養(yǎng)基( GIBCO,,添加NaHCO3 1.5g/L,丙酮酸鈉 0.11g/L);優(yōu)質胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。
1.一般客戶拿到細胞后,應該注意什么?
客戶收到細胞先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議受收細胞時的培養(yǎng)基拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。
收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。
rCF, 大鼠成纖維細胞
3T3?L1 小鼠脂肪細胞
GPNMB Others Human 人 GPNMB / HGFIN 人細胞裂解液 (陽性對照)
CL-0246YAC-1(小鼠細胞)5×106cells/瓶×2
人骨骼肌成肌細胞cDNAHSkMM cDNA
穩(wěn)定表達EBNA1的人胚腎細胞;293E 人腎皮層上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL
CL-0144LoVo(人細胞)5×106cells/瓶×2
GPT2 Others Rat 大鼠 GPT2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
人腎系膜細胞裂解物HRMCL
SK-OV-3[SKOV-3]細胞,人細胞 人上皮細胞,HBE細胞 腦膜細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
兔角膜前基質層成纖維細胞;RCFBF
TEK Others Human 人 Tie2 / CD202b 人細胞裂解液 (陽性對照)
rCF, 大鼠成纖維細胞
3T3?L1 小鼠脂肪細胞
GPNMB Others Human 人 GPNMB / HGFIN 人細胞裂解液 (陽性對照)
CL-0246YAC-1(小鼠細胞)5×106cells/瓶×2
人骨骼肌成肌細胞cDNAHSkMM cDNA
穩(wěn)定表達EBNA1的人胚腎細胞;293E 人腎皮層上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL
麥康凱瓊脂2號250g用于腸道致病菌的選擇性分離、培養(yǎng)(OXOID方法)
Malt extract agar麥芽瓊脂 1.05398.0500 MERCK默克 incubation media Malt extract agar麥芽瓊脂 1.05398.0500 MERCK默克
胰月示-亞鹽-環(huán)絲氨酸瓊脂基礎(TSC) 100g 用于食品和臨床樣本中產氣莢膜梭菌的分離培養(yǎng)和計數(SN0177-92,ISO標準)。
大鼠肝細胞完全培養(yǎng)基Mediumofratlivercells
Eosin-MethyleneBlueAgar
麥康凱瓊脂NO.323020250g用于食品和環(huán)境樣本中沙門氏菌(傷寒沙門氏菌除外)的選擇性增菌培養(yǎng)(GB/T4789.28-2003中4...
布魯氏培養(yǎng)基基礎 (CM0169) Oxoid incubation media 布魯氏培養(yǎng)基基礎 (CM0169) Oxoid
人蒼白桿菌 模式菌株 支/瓶
CVT瓊脂250g用于乳制品中嗜冷菌的計數
大豆酪蛋白消化物瓊脂培養(yǎng)基 250g 用于藥品中需氧菌總數測定
人體*細胞系,HEK-293T細胞圖片多粘菌素B(U*5)3.3mg/支*5每支添加于HB0249中
Endo培養(yǎng)基 Endo Agar 用于大腸菌群的確診試驗(APHA)
中國藍瓊脂 China Blue Agar 250 弱選擇性培養(yǎng)基,用于腸道致病菌的選擇性分離
孟加拉紅培養(yǎng)基250g/瓶用于霉菌和酵母菌計數incubationmedia孟加拉紅培養(yǎng)基250g/瓶用于霉菌和酵母菌計數
改良EC肉湯(mEC+n) 250g 用于0157選擇性增菌(GB標準)
人體*細胞系,HEK-293T細胞圖片細胞出現問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
(1)客戶造成細胞污染,不重發(fā);
(2)客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(3)非推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(4)細胞狀態(tài)不好,未提供細胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
(5)細胞培養(yǎng)時經其它處理的,不重發(fā);
(6)細胞收到2天內,未告知,不重發(fā);
(7)視具體情況而定。