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產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 上海莼試 |
貨號 | CS-X0195 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
英文名稱 | 1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶 |
保質(zhì)期 | 詳見說明書個月 |
產(chǎn)品名稱:人胚,HELF細胞價格
規(guī)格 :1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶
細胞特性
1)來源:肺
2)形態(tài):成纖維細胞,貼壁生長
3)含量:>1x106 個/mL
4)污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5)規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
人胚,HELF細胞價格細胞接受后的處理:
1)收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2)請先在顯微鏡下確認(rèn)細胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
4)如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
5)接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉寐?lián)系。
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備基礎(chǔ)培養(yǎng)基( GIBCO,,添加NaHCO3 1.5g/L,丙酮酸鈉 0.11g/L);優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二. 細胞處理:
1) 復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?/span>250px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。
1.一般客戶拿到細胞后,應(yīng)該注意什么?
客戶收到細胞先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞時的培養(yǎng)基拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責(zé)免費發(fā)送一株細胞。
收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。
人胚,HELF細胞價格細胞出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
(1)客戶造成細胞污染,不重發(fā);
(2)客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(3)非推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(4)細胞狀態(tài)不好,未提供細胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
(5)細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
(6)細胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);
(7)視具體情況而定。
小鼠神經(jīng)干細胞(EGFP標(biāo)記)
PA319 人細胞
TCN2 Others Mouse 小鼠 TCN2 / anscobalamin-II 人細胞裂解液 (陽性對照)
CL-0466WI38/VA13(SV-40Z轉(zhuǎn)化)5×106cells/瓶×2
人肝星形細胞RNAHHSteC miRNA5 μg
人淋巴細胞;1301 人腸動脈內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL
CL-0202Saos-2(人細胞)5×106cells/瓶×2
TNFRSF14 Others Mouse 小鼠 HVEM / TNFRSF14 CHO細胞裂解液 (陽性對照)
人雪旺細胞cDNAHSC cDNA
豬內(nèi)皮細胞;ZYM-SVEC01 細胞,SW1353細胞 EMT-6細胞,小鼠癌細胞株
人整合SV40基因的上皮細胞;HBL-100 [HBL100]
HA Others H1N1 甲型 H1N1 (A/WSN/1933) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠神經(jīng)干細胞(EGFP標(biāo)記)
PA319 人細胞
TCN2 Others Mouse 小鼠 TCN2 / anscobalamin-II 人細胞裂解液 (陽性對照)
CL-0466WI38/VA13(SV-40Z轉(zhuǎn)化)5×106cells/瓶×2
人肝星形細胞RNAHHSteC miRNA5 μg
人淋巴細胞;1301 人腸動脈內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL
明膠培養(yǎng)基(營養(yǎng)明膠)22250供測定細菌液化明膠使用(GB-2002和GB/T4789.28-2003中3./T4789.35-2003)。
XLD 培養(yǎng)基 (CM0469) Oxoid incubation media XLD 培養(yǎng)基 (CM0469) Oxoid
雙孢蘑菇(白蘑菇、洋蘑菇) 產(chǎn)延胡索酸 支/瓶
Korser氏枸椽酸鹽肉湯用于細菌枸椽酸鹽試驗(SN標(biāo)準(zhǔn))
AgarmediumS(R2A)
莫匹羅星鹽5mg/支*5支/包每支添加于莫匹羅星鹽改良MRS培養(yǎng)基中
察氏瓊脂 Czapek Dox Agar 用于青霉,曲霉鑒定及保存菌種用(GB標(biāo)準(zhǔn))
特殊蛋白胨 Peptone Special 250克 BR
甘油天門冬素瓊脂基礎(chǔ)ISPMedium5(GlycerolAsparagineAgarBase)250g/瓶用于鏈霉菌屬的培養(yǎng)鑒定,每培養(yǎng)基中需添加甘油)incubationmedia甘油天門冬素瓊脂基礎(chǔ)ISPMedium5(GlycerolAsparagineAgarBase)250g/瓶用于鏈霉菌屬的培養(yǎng)鑒定,每培養(yǎng)基中需添加甘油)
腸道菌增菌肉湯 250g 用于腸桿菌科細菌的選擇性增菌培養(yǎng)。
人胚,HELF細胞價格GN增菌液9ml*20支/包主要用于志賀氏菌的增菌培養(yǎng),亦可用于沙門氏菌增菌培養(yǎng)
dragon牙膏稀釋緩沖液 250g 用于牙膏稀釋的稀釋液
YM瓊脂 YM Agar 250 用于霉菌、酵母菌及耐酸菌的分離培養(yǎng)(Acumedia方法)
Eugon肉湯250g/瓶廣泛用于微生物的培養(yǎng)incubationmediaEugon肉湯250g/瓶廣泛用于微生物的培養(yǎng)
TCBS瓊脂平板(9cm) 10個/包 用于致病性弧菌的選擇性分離