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產地 | 進口、國產 |
品牌 | 上海莼試 |
貨號 | CS-X0173 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
英文名稱 | 1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶 |
保質期 | 詳見說明書個月 |
產品名稱:人結直腸腺癌細胞,COLO320細胞說明書
規(guī)格 :1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶
細胞特性
1)來源:人
2)形態(tài):上皮細胞樣
3)含量:>1x106個/mL
4)污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5)規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
人結直腸腺癌細胞,COLO320細胞說明書細胞接受后的處理:
1)收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2)請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
4)如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
5)接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發(fā)現污染或疑似污染,請及時與我們取得聯系。
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備基礎培養(yǎng)基( GIBCO,,添加NaHCO3 1.5g/L,丙酮酸鈉 0.11g/L);優(yōu)質胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。
1.一般客戶拿到細胞后,應該注意什么?
客戶收到細胞先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議受收細胞時的培養(yǎng)基拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。
收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。
人結直腸腺癌細胞,COLO320細胞說明書細胞出現問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
(1)客戶造成細胞污染,不重發(fā);
(2)客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(3)非推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(4)細胞狀態(tài)不好,未提供細胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
(5)細胞培養(yǎng)時經其它處理的,不重發(fā);
(6)細胞收到2天內,未告知,不重發(fā);
(7)視具體情況而定。
DKK1 Protein Rhesus 重組恒河猴 DKK-1 / Dkk1 蛋白 (256 Asn/Gln, Fc 標簽)
MV3 人細胞
ENPP7 Others Mouse 小鼠 ENPP7 / NPP-7 人細胞裂解液 (陽性對照)
MG-63人細胞 Human osteosarcoma cell line MG-63 MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%優(yōu)質熱滅活FBS
EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0910
人胚;HFL1 人淋巴成纖維細胞完全培養(yǎng)基 100mL
CL-0247ZR-75-1(人癌細胞)5×106cells/瓶×2
NRG1 Others Human 人 NRG1-alpha (ECD) 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠甲狀腺上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL
Sf9昆蟲卵巢細胞 Sf9 insect ovarian cells GPM-115無血清無蛋白昆蟲細胞懸浮培養(yǎng)基(金普諾安 Cat#GPM001L01)
IL1A Protein Human 重組人 IL-1 alpha / IL1A / IL1F1 蛋白
PC-3M-IE8(人高轉移細胞株) 5×106cells/瓶×2 Lec1(卵巢細胞)
DKK1 Protein Rhesus 重組恒河猴 DKK-1 / Dkk1 蛋白 (256 Asn/Gln, Fc 標簽)
MV3 人細胞
ENPP7 Others Mouse 小鼠 ENPP7 / NPP-7 人細胞裂解液 (陽性對照)
MG-63人細胞 Human osteosarcoma cell line MG-63 MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%優(yōu)質熱滅活FBS
EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0910
人胚;HFL1 人淋巴成纖維細胞完全培養(yǎng)基 100mL
念珠菌顯色培養(yǎng)基l用于白色念珠菌分離和鑒定
溴甲酚紫葡萄糖肉湯 250(g) incubation media 溴甲酚紫葡萄糖肉湯 250(g)
李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基 1000ml/瓶 用于分離和初步鑒別單增李斯特氏菌和其它李斯特菌
煙酸測定培養(yǎng)基250用于*食品和乳粉中煙酸和煙酰胺測定incubationmedia煙酸測定培養(yǎng)基250用于*食品和乳粉中煙酸和煙酰胺測定
PolymyxinB
檸檬酸鐵銨(0.05g/支)每支添加于MFB培養(yǎng)基中
乳酸桿菌選擇性瓊脂 Lactobacillus Selective Agar 用于乳酸桿菌檢測和分離培養(yǎng)
NAC瓊脂培養(yǎng)基 NAC Agar Medium 100克 假單胞菌屬分離培養(yǎng)
固氮(莖瘤)根瘤菌培養(yǎng)基250g/瓶用于(莖瘤)根瘤菌培養(yǎng)incubationmedia固氮(莖瘤)根瘤菌培養(yǎng)基250g/瓶用于(莖瘤)根瘤菌培養(yǎng)
BETA-SSAAgar
人結直腸腺癌細胞,COLO320細胞說明書MannitolSaltAgarMedium
DG-18瓊脂基礎 250(g) incubation media DG-18瓊脂基礎 250(g)
Aliz-gal瓊脂 100g 用于大腸菌群平板計數的快速檢測
多粘菌素B用培養(yǎng)基多粘菌素B效價測定
LactoseSulfiteMedium(LS)