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產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 上海莼試 |
貨號(hào) | CS-X0150 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
英文名稱 | 1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶 |
保質(zhì)期 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書個(gè)月 |
產(chǎn)品名稱:人直腸腺癌細(xì)胞,NCI-H508細(xì)胞規(guī)格
規(guī)格 :1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶
細(xì)胞特性
1) 來(lái)源:人直腸腺癌細(xì)胞,NCI-H508細(xì)胞
2) 含量:>1x106 個(gè)/mL
3) 污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)為陰性
4) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
人直腸腺癌細(xì)胞,NCI-H508細(xì)胞規(guī)格細(xì)胞接受后的處理:
1)收到細(xì)胞后,請(qǐng)檢查是否漏液,如果漏液,請(qǐng)拍照片發(fā)給我們。
2)請(qǐng)先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
4)如果細(xì)胞長(zhǎng)滿(90%以上)請(qǐng)及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
5)接到細(xì)胞次日,請(qǐng)檢查細(xì)胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請(qǐng)及時(shí)與我們?nèi)〉寐?lián)系。
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備基礎(chǔ)培養(yǎng)基( GIBCO,,添加NaHCO3 1.5g/L,丙酮酸鈉 0.11g/L);優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
1.一般客戶拿到細(xì)胞后,應(yīng)該注意什么?
客戶收到細(xì)胞先不開(kāi)蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞時(shí)的培養(yǎng)基拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細(xì)胞100X,200X各一張),排除細(xì)胞本身污染的情況;收到細(xì)胞未開(kāi)封,出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。
收到細(xì)胞時(shí)如無(wú)異常情況,請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度,如為貼壁細(xì)胞,未超過(guò)80%匯合度時(shí),將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過(guò)80%匯合度時(shí),請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。
人直腸腺癌細(xì)胞,NCI-H508細(xì)胞規(guī)格細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
(1)客戶造成細(xì)胞污染,不重發(fā);
(2)客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(3)非推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(4)細(xì)胞狀態(tài)不好,未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
(5)細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
(6)細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);
(7)視具體情況而定。
VSTM1 Protein Human 重組人 VSTM1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
MA891瘤 癌
IGFBP7 Others Human 人 IGFBP7 / IBP-7 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
BT-549人管癌細(xì)胞 BT-549 human breast duct carcinoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS
C3H/An小鼠結(jié)締組織細(xì)胞(L929-TK-);LTK-
人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞;HK-2 人肺大內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL
CL-0294MuM-2C(人眼脈絡(luò)細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
CHL1 Others Mouse 小鼠 CHL-1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人肺間充質(zhì)干細(xì)胞cDNAHPMSC cDNA
豬源細(xì)胞 皮膚細(xì)胞,CCD-1095Sk細(xì)胞 ZM755細(xì)胞,615小鼠滑膜瘤株
人APP-PS1雙基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞株(HEK293);APP-PS1
HA Others H5N2 甲型 H5N2 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
VSTM1 Protein Human 重組人 VSTM1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
MA891瘤 癌
IGFBP7 Others Human 人 IGFBP7 / IBP-7 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
BT-549人管癌細(xì)胞 BT-549 human breast duct carcinoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS
C3H/An小鼠結(jié)締組織細(xì)胞(L929-TK-);LTK-
人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞;HK-2 人肺大內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL
皮膚癬菌鑒別瓊脂(DTM)250g用于皮膚癬菌鑒別培養(yǎng)
Honda氏產(chǎn)毒肉湯基礎(chǔ) 250(g) incubation media Honda氏產(chǎn)毒肉湯基礎(chǔ) 250(g)
氰化高鐵血紅蛋白參比液(4種×2套) Cyanomethemoglobin reference solution 10毫升×8支
沙氏瓊脂培養(yǎng)基250用于衛(wèi)生用品的真菌檢測(cè)incubationmedia沙氏瓊脂培養(yǎng)基250用于衛(wèi)生用品的真菌檢測(cè)
革蘭氏染色液 5ml*8 用于細(xì)菌的革蘭氏染色試驗(yàn)
匹克氏肉湯基礎(chǔ)B250g用于溶血性鏈球菌選擇性增菌培養(yǎng)。
亞鹽-多粘菌素-磺胺嘧啶瓊脂基礎(chǔ) Sulfite-Polymyxin-Sulphadiazine Agar Base 用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的平板計(jì)數(shù)(GB標(biāo)準(zhǔn))
LST肉湯 LST Broth 250克 各種食品中大腸菌群最近似值(MPN)測(cè)定
營(yíng)養(yǎng)瓊脂(NA)細(xì)菌計(jì)數(shù)、不含糖,可作血瓊脂基礎(chǔ)和傳代用(GB標(biāo)準(zhǔn))incubationmedia營(yíng)養(yǎng)瓊脂(NA)細(xì)菌計(jì)數(shù)、不含糖,可作血瓊脂基礎(chǔ)和傳代用(GB標(biāo)準(zhǔn))
甘露醇鹽瓊脂 250g 用于金黃色葡萄球菌的選擇性分離培養(yǎng)
人直腸腺癌細(xì)胞,NCI-H508細(xì)胞規(guī)格DRBC瓊脂250g用于食品中霉菌及酵母菌分離培養(yǎng)
D/E中和肉湯 250(g) incubation media D/E中和肉湯 250(g)
SS瓊脂平板 SS Agar Plate 10塊 沙門菌屬和志賀菌屬細(xì)菌的分離培養(yǎng)
多粘菌素B/支*5用水溶解后添加于HB0256中incubationmedia多粘菌素B/支*5用水溶解后添加于HB0256中
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