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產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 上海莼試 |
貨號 | CS-X0146 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
英文名稱 | 1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶 |
保質(zhì)期 | 詳見說明書個月 |
產(chǎn)品名稱:人急性非B非T淋巴細(xì)胞細(xì)胞,REH細(xì)胞規(guī)格
規(guī)格 :1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶
細(xì)胞特性
1) 來源:人急性非B非T淋巴細(xì)胞細(xì)胞,REH細(xì)胞
2) 含量:>1x106 個/mL
3) 污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測為陰性
4) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
人急性非B非T淋巴細(xì)胞細(xì)胞,REH細(xì)胞規(guī)格細(xì)胞接受后的處理:
1)收到細(xì)胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2)請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
4)如果細(xì)胞長滿(90%以上)請及時進(jìn)行細(xì)胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
5)接到細(xì)胞次日,請檢查細(xì)胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉寐?lián)系。
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備基礎(chǔ)培養(yǎng)基( GIBCO,,添加NaHCO3 1.5g/L,丙酮酸鈉 0.11g/L);優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
1.一般客戶拿到細(xì)胞后,應(yīng)該注意什么?
客戶收到細(xì)胞先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞時的培養(yǎng)基拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細(xì)胞100X,200X各一張),排除細(xì)胞本身污染的情況;收到細(xì)胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費發(fā)送一株細(xì)胞。
收到細(xì)胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細(xì)胞密度,如為貼壁細(xì)胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。
人急性非B非T淋巴細(xì)胞細(xì)胞,REH細(xì)胞規(guī)格細(xì)胞出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
(1)客戶造成細(xì)胞污染,不重發(fā);
(2)客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(3)非推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(4)細(xì)胞狀態(tài)不好,未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
(5)細(xì)胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
(6)細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);
(7)視具體情況而定。
RETN Protein Mouse 重組小鼠 Resistin / ADSF / RETN 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
LTPEP-a-2 人
CD33 Others Mouse 小鼠 CD33 / Siglec-3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
MDA-MB-453人癌細(xì)胞 Human breast cancer cell line MDA-MB-453 L-15+10%FBS
小鼠瘤株;H22
人胚;CCC-HPF-1 SK-N-SH, 人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 Human
CL-0301M-NFS-60 (小鼠細(xì)胞G-CSF依賴性)5×106cells/瓶×2
HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/bar-headed goose/Qinghai/14/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人臍動脈平滑肌細(xì)胞cDNAHUASMC cDNA
V79細(xì)胞,中國倉鼠肺細(xì)胞 人亞歷山大細(xì)胞系,PLC/PRF/5細(xì)胞 膀胱上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
猞猁皮膚成纖維樣細(xì)胞;ELS1
VCAM1 Others Human 人 CD106 / VCAM1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
RETN Protein Mouse 重組小鼠 Resistin / ADSF / RETN 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
LTPEP-a-2 人
CD33 Others Mouse 小鼠 CD33 / Siglec-3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
MDA-MB-453人癌細(xì)胞 Human breast cancer cell line MDA-MB-453 L-15+10%FBS
小鼠瘤株;H22
人胚;CCC-HPF-1 SK-N-SH, 人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 Human
品紅亞培養(yǎng)基(遠(yuǎn)藤瓊脂培養(yǎng)基)2250g用于水中大腸菌群的分離或確證試驗。
麥芽浸膏瓊脂 (CM0059) Oxoid incubation media 麥芽浸膏瓊脂 (CM0059) Oxoid
擬青霉 支/瓶
改良EC肉湯(mEC+n)250g用于0性增菌(GB標(biāo)準(zhǔn))
MannitolSaltAgarMedium
葡萄糖銨培養(yǎng)基2300g用于鑒別細(xì)菌利用*作為氮源并分解葡萄糖的試驗(GB/T4789.28-2003中3.8,GB/T4789.5-20...
7531-prf MODM-prf 間充質(zhì)干細(xì)胞成骨細(xì)胞分化培養(yǎng)基 500 ml incubation media 7531-prf MODM-prf 間充質(zhì)干細(xì)胞成骨細(xì)胞分化培養(yǎng)基 500 ml
結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂(VRBA) 300ml/袋*10 用于大腸菌群的固體平板檢測
StaphylococcusEnrichmentBroth
photobacteriumMedium
人急性非B非T淋巴細(xì)胞細(xì)胞,REH細(xì)胞規(guī)格Silicatebacteriamedium(withoutAgar)
D/E (Dey/Engley) Neutralizing Broth incubation media D/E (Dey/Engley) Neutralizing Broth
多形魯氏酵母 支/瓶
FuchsinBasicSodiumSulfideAgar
DG-18Agar