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產(chǎn)品名稱：人細(xì)胞，sw1353細(xì)胞說明書
規(guī)格 ：1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶
細(xì)胞特性
1）來源：軟

2）形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣，貼壁生長

3）含量：>1x106 個(gè)/mL

4）污染：支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測為陰性

5）規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

人細(xì)胞，sw1353細(xì)胞說明書細(xì)胞接受后的處理：
1）收到細(xì)胞后，請檢查是否漏液，如果漏液，請拍照片發(fā)給我們。
2）請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3）棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
4）如果細(xì)胞長滿（90%以上）請及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代，傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
5）接到細(xì)胞次日，請檢查細(xì)胞是否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請及時(shí)與我們?nèi)〉寐?lián)系。
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備基礎(chǔ)培養(yǎng)基( GIBCO，，添加NaHCO3 1.5g/L，丙酮酸鈉 0.11g/L)；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。

二． 細(xì)胞處理：

1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
1.一般客戶拿到細(xì)胞后，應(yīng)該注意什么？
客戶收到細(xì)胞先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后（看細(xì)胞密度而定）在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議受收細(xì)胞時(shí)的培養(yǎng)基拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細(xì)胞100X，200X各一張），排除細(xì)胞本身污染的情況；收到細(xì)胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。
收到細(xì)胞時(shí)如無異常情況，請?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過80%匯合度時(shí)，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過80%匯合度時(shí)，請按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。
人細(xì)胞，sw1353細(xì)胞說明書細(xì)胞出現(xiàn)問題，不予以重發(fā)的情況有哪些？
（1）客戶造成細(xì)胞污染，不重發(fā)；
（2）客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
（3）非推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
（4）細(xì)胞狀態(tài)不好，未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā)；
（5）細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的，不重發(fā)；
（6）細(xì)胞收到2天內(nèi)，未告知，不重發(fā)；
（7）視具體情況而定。
HGF Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白

KG-1 人髓性紅細(xì)胞

ULBP2 Others Human 人 ULBP2 / N2DL-2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

HeLa 229人細(xì)胞 HeLa 229 human cervical cancer cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS

中國倉鼠肺細(xì)胞;R 1610 [R1610]

小鼠周神經(jīng)成纖維細(xì)胞(MPNF)(5×105) HL-60, 人早幼粒細(xì)胞 Human
CL-0336FC33(人胚胎腎細(xì)胞(Asp-2基因修飾))5×106cells/瓶×2

CS Others Human 人 Ciate syhase / CS 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人腸平滑肌細(xì)胞總RNAHISMC NA

山羊皮膚細(xì)胞;WGS1 大鼠心肌細(xì)胞，H9c2細(xì)胞 Ca759細(xì)胞，615小鼠株

人胚胎成纖維樣細(xì)胞;HEH2

HA Others H1N2 甲型 H1N2 (A/swine/Guangxi/13/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
HGF Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白

KG-1 人髓性紅細(xì)胞

ULBP2 Others Human 人 ULBP2 / N2DL-2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

HeLa 229人細(xì)胞 HeLa 229 human cervical cancer cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS

中國倉鼠肺細(xì)胞;R 1610 [R1610]

小鼠周神經(jīng)成纖維細(xì)胞(MPNF)(5×105) HL-60, 人早幼粒細(xì)胞 Human
普通肉湯培養(yǎng)基250g用于金黃色葡萄球菌的增菌培養(yǎng)

結(jié)晶紫中性紅膽鹽葡萄糖瓊脂(VRBGA) 用于奶粉中阪崎桿菌的分離培養(yǎng)(FDA、SN方法)

抗生素3號培養(yǎng)基 Antibiotic Agar NO.3 250克 藤黃八疊球菌懸液的制備

溶液5ml*添加于HB0ncubationmedia溶液5ml*添加于HB0121

兔血漿 0.5ml*10 用于金黃色葡萄球菌凝固酶試驗(yàn)
其它培養(yǎng)基

Eosin Methylene Blue Agar, Levine incubation media Eosin Methylene Blue Agar, Levine

肺形側(cè)耳、柳樹菌、樹窩 支/瓶

慶大霉素瓊脂平板(9cm)用于霍亂弧菌的分離培養(yǎng)

BIGGY瓊脂 250g 用于念珠菌的分離培養(yǎng)和計(jì)數(shù)
人細(xì)胞，sw1353細(xì)胞說明書JMMediumBase

Columbia Blood Agar Base incubation media Columbia Blood Agar Base

不動(dòng)桿菌 支/瓶

FBf-Fraser)添加劑(A、B)2ml/支*40每支添加到225mlHBJ006中

酪胨瓊脂 250g 用于藥品，生物制品無菌試驗(yàn)