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產(chǎn)品名稱(chēng)：人高轉(zhuǎn)移細(xì)胞，95-D細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
規(guī)格 ：1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶
細(xì)胞特性
1）來(lái)源：

2）形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

3）含量：>1x106 個(gè)/mL

4）污染：支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)為陰性

5）規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

人高轉(zhuǎn)移細(xì)胞，95-D細(xì)胞說(shuō)明書(shū)細(xì)胞接受后的處理：
1）收到細(xì)胞后，請(qǐng)檢查是否漏液，如果漏液，請(qǐng)拍照片發(fā)給我們。
2）請(qǐng)先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3）棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
4）如果細(xì)胞長(zhǎng)滿(mǎn)（90%以上）請(qǐng)及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代，傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
5）接到細(xì)胞次日，請(qǐng)檢查細(xì)胞是否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請(qǐng)及時(shí)與我們?nèi)〉寐?lián)系。
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備基礎(chǔ)培養(yǎng)基( GIBCO，，添加NaHCO3 1.5g/L，丙酮酸鈉 0.11g/L)；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。

二． 細(xì)胞處理：

1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
1.一般客戶(hù)拿到細(xì)胞后，應(yīng)該注意什么？
客戶(hù)收到細(xì)胞先不開(kāi)蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后（看細(xì)胞密度而定）在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議受收細(xì)胞時(shí)的培養(yǎng)基拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細(xì)胞100X，200X各一張），排除細(xì)胞本身污染的情況；收到細(xì)胞未開(kāi)封，出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。
收到細(xì)胞時(shí)如無(wú)異常情況，請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過(guò)80%匯合度時(shí)，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過(guò)80%匯合度時(shí)，請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。
人高轉(zhuǎn)移細(xì)胞，95-D細(xì)胞說(shuō)明書(shū)細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題，不予以重發(fā)的情況有哪些？
（1）客戶(hù)造成細(xì)胞污染，不重發(fā)；
（2）客戶(hù)不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
（3）非推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
（4）細(xì)胞狀態(tài)不好，未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā)；
（5）細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的，不重發(fā)；
（6）細(xì)胞收到2天內(nèi)，未告知，不重發(fā)；
（7）視具體情況而定。
VEGFA Protein Human 重組人 VEGF121b / VEGF-A 蛋白

HGC-27 人細(xì)胞(未分化)

CD80 Others Mouse 小鼠 CD80 / B7-1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

HuT 78人T淋巴細(xì)胞細(xì)胞 HuT 78 human T lymphocyte leukemia cell IMDM培養(yǎng)基+20%FBS

非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-E1;Vero-HCV-E1

大鼠雪旺細(xì)胞(RSC)(5×105) 786-O [786-0], 人腎透明腺癌細(xì)胞 Human
CL-0386MPC-11(小鼠漿細(xì)胞瘤)5×106cells/瓶×2

EFNB1 Others Rat 大鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

小鼠氣管平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL

EJ人細(xì)胞 Human bladder cancer cell line EJ 1640+10% FBS

IL36B Protein Mouse 重組小鼠 IL1F8 / IL36b 蛋白

NCI-H23(人非小細(xì)胞細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 THP-1(單核細(xì)胞)
VEGFA Protein Human 重組人 VEGF121b / VEGF-A 蛋白

HGC-27 人細(xì)胞(未分化)

CD80 Others Mouse 小鼠 CD80 / B7-1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

HuT 78人T淋巴細(xì)胞細(xì)胞 HuT 78 human T lymphocyte leukemia cell IMDM培養(yǎng)基+20%FBS

非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-E1;Vero-HCV-E1

大鼠雪旺細(xì)胞(RSC)(5×105) 786-O [786-0], 人腎透明腺癌細(xì)胞 Human
瓊脂培養(yǎng)基L250g用于沙門(mén)氏菌的選擇性分離培養(yǎng)

APT agar APT瓊脂 1.10453.0500 MERCK默克 incubation media APT agar APT瓊脂 1.10453.0500 MERCK默克

胰酪胨大豆酵母浸膏瓊脂 250g 廣泛用于細(xì)菌的培養(yǎng)，特別用于食品中李斯特氏菌的分離培養(yǎng)(GB/T4789.30-2010和SN/T 0184-2005，I...

假單胞分離瓊脂PseudomonasIsolationAgar用于假單胞菌群的測(cè)定

氯化血紅素 1g 添加于HB0398中
瓊脂培養(yǎng)基L250g用于沙門(mén)氏菌的選擇性分離培養(yǎng)

APT agar APT瓊脂 1.10453.0500 MERCK默克 incubation media APT agar APT瓊脂 1.10453.0500 MERCK默克

胰酪胨大豆酵母浸膏瓊脂 250g 廣泛用于細(xì)菌的培養(yǎng)，特別用于食品中李斯特氏菌的分離培養(yǎng)(GB/T4789.30-2010和SN/T 0184-2005，I...

假單胞分離瓊脂PseudomonasIsolationAgar用于假單胞菌群的測(cè)定

氯化血紅素 1g 添加于HB0398中
人高轉(zhuǎn)移細(xì)胞，95-D細(xì)胞說(shuō)明書(shū)結(jié)晶紫中性紅膽鹽葡萄糖瓊脂(VRBGA)22222250g用于阪崎腸桿菌的選擇性分離培養(yǎng)以及腸道菌的計(jì)數(shù)和鑒別(SN/T5)。

Casein 干酪素 500g incubation media Casein 干酪素 500g

委內(nèi)瑞拉鏈霉菌 支/瓶

M-EndoMedium

TCH(噻吩-2-羧酸酰肼) 0.1g 加入改良羅氏培養(yǎng)基中制成TCH培養(yǎng)基，用于分枝桿菌鑒定