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產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 上海莼試 |
貨號(hào) | CS-X0098 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
英文名稱 | 1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶 |
保質(zhì)期 | 詳見說明書個(gè)月 |
產(chǎn)品名稱:人細(xì)胞,SJSA-1細(xì)胞規(guī)格
規(guī)格 :1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶
細(xì)胞特性
1)來源:原發(fā)性股骨
2)形態(tài):成纖維細(xì)胞,貼壁生長(zhǎng)
3)含量:>1x106 個(gè)/mL
4)污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)為陰性
5)規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
人細(xì)胞,SJSA-1細(xì)胞規(guī)格細(xì)胞接受后的處理:
1)收到細(xì)胞后,請(qǐng)檢查是否漏液,如果漏液,請(qǐng)拍照片發(fā)給我們。
2)請(qǐng)先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
4)如果細(xì)胞長(zhǎng)滿(90%以上)請(qǐng)及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
5)接到細(xì)胞次日,請(qǐng)檢查細(xì)胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請(qǐng)及時(shí)與我們?nèi)〉寐?lián)系。
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備基礎(chǔ)培養(yǎng)基( GIBCO,,添加NaHCO3 1.5g/L,丙酮酸鈉 0.11g/L);優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
1.一般客戶拿到細(xì)胞后,應(yīng)該注意什么?
客戶收到細(xì)胞先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞時(shí)的培養(yǎng)基拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細(xì)胞100X,200X各一張),排除細(xì)胞本身污染的情況;收到細(xì)胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。
收到細(xì)胞時(shí)如無異常情況,請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度,如為貼壁細(xì)胞,未超過80%匯合度時(shí),將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時(shí),請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。
TNFSF13B Protein Human 重組人 BLyS / TNFSF13B / BAFF 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
HEL(懸浮) 紅白細(xì)胞細(xì)胞
ST6GAL1 Others Mouse 小鼠 ST6GAL1 / CD75 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
HEC-1-A人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞 HEC-1-A human endomeial adenocarcinoma cells McCOY's 5A+10%FBS
人胚;WI-38 [WI38]
大鼠海馬趾神經(jīng)細(xì)胞(RHh)(1×106) WM451, 人細(xì)胞 Human
CL-0396NCI-H226(人肺鱗癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
CFR Others Human 人 CFR / CFR-alpha 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
人脈絡(luò)叢上皮細(xì)胞RNAHCPEpiC miRNA5 μg
6T-CEM細(xì)胞,T細(xì)胞 人巨細(xì)胞性細(xì)胞,801-D細(xì)胞 細(xì)胞
貓腎細(xì)胞;CRFK
ADAM15 Others Human 人 ADAM15 / MDC15 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
TNFSF13B Protein Human 重組人 BLyS / TNFSF13B / BAFF 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
HEL(懸浮) 紅白細(xì)胞細(xì)胞
ST6GAL1 Others Mouse 小鼠 ST6GAL1 / CD75 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
HEC-1-A人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞 HEC-1-A human endomeial adenocarcinoma cells McCOY's 5A+10%FBS
人胚;WI-38 [WI38]
大鼠海馬趾神經(jīng)細(xì)胞(RHh)(1×106) WM451, 人細(xì)胞 Human
去氧膽酸鹽瓊脂2850g用于革蘭氏陰性腸道菌的選擇性分離和平板計(jì)數(shù)。
蛋白胨水Peptone Water Oxoid 500g incubation media 蛋白胨水Peptone Water Oxoid 500g
滅蚊鏈霉菌 超高分子量透明質(zhì)酸 支/瓶
山梨醇麥康凱瓊脂添加劑每200mlHB0基中添加孢克肟0.0碲酸0.5mg)
PPLO肉湯 250g 用于培養(yǎng)支原體的基礎(chǔ)培養(yǎng)基
去氧膽酸鹽瓊脂2850g用于革蘭氏陰性腸道菌的選擇性分離和平板計(jì)數(shù)。
蛋白胨水Peptone Water Oxoid 500g incubation media 蛋白胨水Peptone Water Oxoid 500g
滅蚊鏈霉菌 超高分子量透明質(zhì)酸 支/瓶
山梨醇麥康凱瓊脂添加劑每200mlHB0基中添加孢克肟0.0碲酸0.5mg)
PPLO肉湯 250g 用于培養(yǎng)支原體的基礎(chǔ)培養(yǎng)基
人細(xì)胞,SJSA-1細(xì)胞規(guī)格MycoplasmaAgarBase
Candida Elective瓊脂 250(g) incubation media Candida Elective瓊脂 250(g)
亮綠乳糖培養(yǎng)液(BGB) 250g 用于多管發(fā)酵法測(cè)定飲用礦泉水中大腸菌群的確證試驗(yàn)(GB/T8538-2008)。
梭菌增菌培養(yǎng)基ClostridiumenrichmentMedium用于梭菌增菌培養(yǎng)
乳糖亞鹽培養(yǎng)基(LS) 250g 用于產(chǎn)氣莢膜梭菌確認(rèn)試驗(yàn)
人細(xì)胞,SJSA-1細(xì)胞規(guī)格細(xì)胞出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
(1)客戶造成細(xì)胞污染,不重發(fā);
(2)客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(3)非推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(4)細(xì)胞狀態(tài)不好,未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
(5)細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
(6)細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);
(7)視具體情況而定。