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產(chǎn)品名稱：人肺鱗癌細(xì)胞，NCI-H520細(xì)胞規(guī)格
規(guī)格 ：1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶
細(xì)胞特性
1） 來(lái)源：人肺鱗癌細(xì)胞，NCI-H520細(xì)胞

2） 含量：>1x106 個(gè)/mL

3） 污染：支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)為陰性

4） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

人肺鱗癌細(xì)胞，NCI-H520細(xì)胞規(guī)格細(xì)胞接受后的處理：
1）收到細(xì)胞后，請(qǐng)檢查是否漏液，如果漏液，請(qǐng)拍照片發(fā)給我們。
2）請(qǐng)先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3）棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
4）如果細(xì)胞長(zhǎng)滿（90%以上）請(qǐng)及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代，傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
5）接到細(xì)胞次日，請(qǐng)檢查細(xì)胞是否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請(qǐng)及時(shí)與我們?nèi)〉寐?lián)系。
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備基礎(chǔ)培養(yǎng)基( GIBCO，，添加NaHCO3 1.5g/L，丙酮酸鈉 0.11g/L)；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。

二． 細(xì)胞處理：

1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
1.一般客戶拿到細(xì)胞后，應(yīng)該注意什么？
客戶收到細(xì)胞先不開(kāi)蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后（看細(xì)胞密度而定）在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議受收細(xì)胞時(shí)的培養(yǎng)基拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細(xì)胞100X，200X各一張），排除細(xì)胞本身污染的情況；收到細(xì)胞未開(kāi)封，出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。
收到細(xì)胞時(shí)如無(wú)異常情況，請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過(guò)80%匯合度時(shí)，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過(guò)80%匯合度時(shí)，請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。
人肺鱗癌細(xì)胞，NCI-H520細(xì)胞規(guī)格細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題，不予以重發(fā)的情況有哪些？
（1）客戶造成細(xì)胞污染，不重發(fā)；
（2）客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
（3）非推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
（4）細(xì)胞狀態(tài)不好，未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā)；
（5）細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的，不重發(fā)；
（6）細(xì)胞收到2天內(nèi)，未告知，不重發(fā)；
（7）視具體情況而定。
CD40LG Protein Human 重組人 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (His 標(biāo)簽)

HCT-15 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞

LAMP2 Others Mouse 小鼠 LAMP2 / CD107b 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

SK-NEP-1人腎母細(xì)胞瘤細(xì)胞 SK-NEP-1 human renal cell McCOY's 5A+15%FBS

人胚腎細(xì)胞;2V6.11

大鼠腦膜細(xì)胞(RMC)(5×105) SP2/0, 小鼠細(xì)胞 Mouse
CL-0400NCI-H358(人非小細(xì)胞細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

ALCAM Others Cynomolgus 食蟹猴 ALCAM / CD166 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人小腦顆粒細(xì)胞RNAHCGC miRNA5 μg

MCF-7/ER36細(xì)胞，人癌細(xì)胞 小鼠胰島素瘤β細(xì)胞(NOD/Lt轉(zhuǎn)基因小鼠，SV40巨T抗原),NIT-1細(xì)胞 MDA-MB-231(ATCC來(lái)源), 人癌細(xì)胞

MKN-28(人高轉(zhuǎn)移細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

HUVEC Growth Medium 2pooled Pellet #N/A > 1 mio.cells 前脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基PAM
CD40LG Protein Human 重組人 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (His 標(biāo)簽)

HCT-15 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞

LAMP2 Others Mouse 小鼠 LAMP2 / CD107b 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

SK-NEP-1人腎母細(xì)胞瘤細(xì)胞 SK-NEP-1 human renal cell McCOY's 5A+15%FBS

人胚腎細(xì)胞;2V6.11

大鼠腦膜細(xì)胞(RMC)(5×105) SP2/0, 小鼠細(xì)胞 Mouse
溶菌酶肉湯基礎(chǔ)250g用于蠟樣芽孢桿菌的溶菌酶試驗(yàn)

BDS培養(yǎng)基 BDS Medium 用于培養(yǎng)擬桿菌

三糖鐵瓊脂(TSI) Triple Sugar Iron Agar 250 用于腸桿菌科細(xì)菌的生化反應(yīng)篩選(葡萄糖，乳糖，蔗糖)

AHM鑒別培養(yǎng)基250g/瓶用于致病性嗜水氣單胞菌的鑒別incubationmediaAHM鑒別培養(yǎng)基250g/瓶用于致病性嗜水氣單胞菌的鑒別

改良山梨醇麥康凱(CT-SMAC)瓊脂 250g 用于大腸桿菌O157的分離培養(yǎng)(GB)標(biāo)準(zhǔn)
溶菌酶肉湯基礎(chǔ)250g用于蠟樣芽孢桿菌的溶菌酶試驗(yàn)

BDS培養(yǎng)基 BDS Medium 用于培養(yǎng)擬桿菌

三糖鐵瓊脂(TSI) Triple Sugar Iron Agar 250 用于腸桿菌科細(xì)菌的生化反應(yīng)篩選(葡萄糖，乳糖，蔗糖)

AHM鑒別培養(yǎng)基250g/瓶用于致病性嗜水氣單胞菌的鑒別incubationmediaAHM鑒別培養(yǎng)基250g/瓶用于致病性嗜水氣單胞菌的鑒別

改良山梨醇麥康凱(CT-SMAC)瓊脂 250g 用于大腸桿菌O157的分離培養(yǎng)(GB)標(biāo)準(zhǔn)
人肺鱗癌細(xì)胞，NCI-H520細(xì)胞規(guī)格WLN培養(yǎng)基250g用于釀造和工業(yè)發(fā)酵過(guò)程中細(xì)菌、酵母菌和霉菌培養(yǎng)

Campy-Cefex瓊脂基礎(chǔ) 100(g) incubation media Campy-Cefex瓊脂基礎(chǔ) 100(g)

霉菌和酵母菌顯色培養(yǎng)基配套平皿 Mould And Yeast Chromogenic Medium Dish 9㎝/塊

PYG液體培養(yǎng)基基礎(chǔ)250用于雙歧桿菌增菌培養(yǎng)，使用時(shí)需加入氯化血紅素和維生素K準(zhǔn))incubationmediaPYG液體培養(yǎng)基基礎(chǔ)250用于雙歧桿菌增菌培養(yǎng)，使用時(shí)需加入氯化血紅素和維生素K準(zhǔn))

葡萄糖胰蛋白胨瓊脂 250g 用于嗜熱菌芽孢(需氧芽孢總數(shù),平酸芽孢和厭氧芽孢)分離培養(yǎng)(SN標(biāo)準(zhǔn))