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產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 上海莼試 |
貨號(hào) | CS-X0076 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
英文名稱(chēng) | 1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶 |
保質(zhì)期 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)個(gè)月 |
產(chǎn)品名稱(chēng):人細(xì)胞,Calu-1細(xì)胞圖片
規(guī)格 :1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶
細(xì)胞特性
1)來(lái)源:
2)形態(tài):上皮細(xì)胞樣,貼壁生長(zhǎng)
3)含量:>1x106 個(gè)/mL
4)污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)為陰性
5)規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
人細(xì)胞,Calu-1細(xì)胞圖片細(xì)胞接受后的處理:
1)收到細(xì)胞后,請(qǐng)檢查是否漏液,如果漏液,請(qǐng)拍照片發(fā)給我們。
2)請(qǐng)先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
4)如果細(xì)胞長(zhǎng)滿(mǎn)(90%以上)請(qǐng)及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
5)接到細(xì)胞次日,請(qǐng)檢查細(xì)胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請(qǐng)及時(shí)與我們?nèi)〉寐?lián)系。
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備基礎(chǔ)培養(yǎng)基( GIBCO,,添加NaHCO3 1.5g/L,丙酮酸鈉 0.11g/L);優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
1.一般客戶(hù)拿到細(xì)胞后,應(yīng)該注意什么?
客戶(hù)收到細(xì)胞先不開(kāi)蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞時(shí)的培養(yǎng)基拍一張照片,觀(guān)察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細(xì)胞100X,200X各一張),排除細(xì)胞本身污染的情況;收到細(xì)胞未開(kāi)封,出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。
收到細(xì)胞時(shí)如無(wú)異常情況,請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀(guān)察細(xì)胞密度,如為貼壁細(xì)胞,未超過(guò)80%匯合度時(shí),將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過(guò)80%匯合度時(shí),請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。
CD70 Protein Rat 重組大鼠 CD70 / CD27L / TNFSF7 蛋白 (His 標(biāo)簽)
Eca-109 人細(xì)胞
PDCD1LG2 Others Mouse 小鼠 B7-DC / PD-L2 / CD273 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
HOS人細(xì)胞 Human osteosarcoma cell line HOS EMEM+10% FBS
人皮膚細(xì)胞;SK-MEL-1
人絨毛間葉成纖維細(xì)胞(HVT)( 5×105 ) MCF-7(MCF7)(ATCC來(lái)源), 人癌細(xì)胞 Human
CL-0428RM1(大鼠肌肉成纖維樣細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
NP Others H1N1 甲型 H1N1 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人牙齦成纖維細(xì)胞RNAHGF miRNA5 μg
Bcap-37細(xì)胞,癌細(xì)胞 人肺巨細(xì)胞癌,PG細(xì)胞 細(xì)胞名稱(chēng)
豚鼠皮膚細(xì)胞;GP-S2
ICOSLG Others Mouse 小鼠 B7-H2 / CD275 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
CD70 Protein Rat 重組大鼠 CD70 / CD27L / TNFSF7 蛋白 (His 標(biāo)簽)
Eca-109 人細(xì)胞
PDCD1LG2 Others Mouse 小鼠 B7-DC / PD-L2 / CD273 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
HOS人細(xì)胞 Human osteosarcoma cell line HOS EMEM+10% FBS
人皮膚細(xì)胞;SK-MEL-1
人絨毛間葉成纖維細(xì)胞(HVT)( 5×105 ) MCF-7(MCF7)(ATCC來(lái)源), 人癌細(xì)胞 Human
乳酸桿菌選擇性瓊脂250g用于乳酸桿菌檢測(cè)和分離培養(yǎng)
慶大霉素瓊脂 Gentamycin Agar 用于霍亂弧菌選擇性分離培養(yǎng)
特級(jí)胎牛血清 Fetal bovine serum(Defined FBS) 100毫升 BR
厭氧基礎(chǔ)瓊脂250g/瓶用于厭氧微生物,尤其是擬桿菌和其它苛養(yǎng)厭氧菌的培養(yǎng),滅菌后需添加5-維羊血incubationmedia厭氧基礎(chǔ)瓊脂250g/瓶用于厭氧微生物,尤其是擬桿菌和其它苛養(yǎng)厭氧菌的培養(yǎng),滅菌后需添加5-維羊血
MEEBroth
乳酸桿菌肉湯培養(yǎng)基2730g用于維生素檢測(cè)菌種的培養(yǎng)基
YT Broth-capsule 培養(yǎng)基 5capsules incubation media YT Broth-capsule 培養(yǎng)基 5capsules
沼澤紅假單胞菌 用于腐乳 . 支/瓶
胰蛋白胨大豆瓊脂5kg/袋一種通用培養(yǎng)基,用于各種微生物的培養(yǎng)
BCYE瓊脂平板 10個(gè)/包 用于軍團(tuán)菌的分離培養(yǎng)
人細(xì)胞,Calu-1細(xì)胞圖片SodiumChlorideVioletpurpleEnrichmentBroth
BSSAagarmedium
LES Endo 瓊脂 m-Endo Agar,LES 250g 用于濾膜細(xì)菌計(jì)數(shù)(Merck方法)
乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基250g/瓶用于大腸菌群測(cè)定incubationmedia乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基250g/瓶用于大腸菌群測(cè)定
2×YT肉湯 250 用于基因工程菌大腸桿菌培養(yǎng)
人細(xì)胞,Calu-1細(xì)胞圖片細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
(1)客戶(hù)造成細(xì)胞污染,不重發(fā);
(2)客戶(hù)不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(3)非推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(4)細(xì)胞狀態(tài)不好,未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
(5)細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
(6)細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);
(7)視具體情況而定。