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產(chǎn)品名稱：大鼠肝細(xì)胞，BRL-3A細(xì)胞說(shuō)明書
規(guī)格 ：1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶
細(xì)胞特性
1）來(lái)源：小鼠肝

2）形態(tài)：上皮細(xì)胞樣，貼壁生長(zhǎng)

3）含量：>1x106 個(gè)/mL

4）污染：支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)為陰性

5）規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

大鼠肝細(xì)胞，BRL-3A細(xì)胞說(shuō)明書細(xì)胞接受后的處理：
1）收到細(xì)胞后，請(qǐng)檢查是否漏液，如果漏液，請(qǐng)拍照片發(fā)給我們。
2）請(qǐng)先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3）棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
4）如果細(xì)胞長(zhǎng)滿（90%以上）請(qǐng)及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代，傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
5）接到細(xì)胞次日，請(qǐng)檢查細(xì)胞是否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請(qǐng)及時(shí)與我們?nèi)〉寐?lián)系。
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091)，85%；馬血清10%，優(yōu)質(zhì)胎牛血清5%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：70%FBS,20%HS，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4.將細(xì)胞懸液按1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為類；

     1，細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗一遍后加入1ml胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。

     2，4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO，輕輕混勻，DMSO終濃度為10%，細(xì)胞密度不低于1x10E6/ml，每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。

     3，將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
1.一般客戶拿到細(xì)胞后，應(yīng)該注意什么？
客戶收到細(xì)胞先不開(kāi)蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后（看細(xì)胞密度而定）在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議受收細(xì)胞時(shí)的培養(yǎng)基拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細(xì)胞100X，200X各一張），排除細(xì)胞本身污染的情況；收到細(xì)胞未開(kāi)封，出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。
收到細(xì)胞時(shí)如無(wú)異常情況，請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過(guò)80%匯合度時(shí)，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過(guò)80%匯合度時(shí)，請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。
CL-0460U14-GFP(小鼠子細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

AACS Others Human 人 AACS / Acetoacetyl-CoA 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人顱骨造骨細(xì)胞RNAHCO miRNA5 μg

HL-60細(xì)胞，原髓細(xì)胞 人非小細(xì)胞細(xì)胞,NCI-H23細(xì)胞 MSC, 小鼠雪旺細(xì)胞

豚鼠胚胎細(xì)胞;104C1

CD226 Others Mouse 小鼠 DNAM-1 / CD226 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
CL-0459U14(小鼠子細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

CN3 Others Mouse 小鼠 Coactin 3 / CN3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

大鼠晶狀體上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL

EB (NBL-4)牛胚氣管細(xì)胞 EB (NBL-4) of bovine embryo acheal cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS

IL36G Protein Mouse 重組小鼠 IL36G / IL1F9 蛋白 (His 標(biāo)簽)

NCI-H446(人小細(xì)胞細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 HeLa(細(xì)胞)
小鼠骨髓間充質(zhì)肝細(xì)胞(MMSC-bm)(5×105)

人虹膜色素上皮細(xì)胞cDNAHIPEpiC cDNA

大鼠腦細(xì)胞;C6

雜交瘤(B類);Z1510C6D10F4G6 小鼠脈絡(luò)膜細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL

HAVSMC, 人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 Human

EFNA1 Others Mouse 小鼠 EFNA1 / Ephrin-A1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
小鼠水通道蛋白4(AQP-4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat maix metalloproteinase 1 (MMP-1) ELISA Kit 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)ELISA試劑盒

HumanGuaninenucleotidedissociationInhibitor,GDIELISAKit 人鳥(niǎo)苷酸解離抑制因子(GDI)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Duckcyclicadenosinemonophosphate,cAMPELISA試劑盒鴨環(huán)磷酸腺苷(cAMP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細(xì)胞組蛋白H3-K4甲基化熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒(針對(duì)一甲基)10/20次

MouseD-LactateDehydrogenase,D-LDHELISAKit小鼠D-乳酸脫氫酶(D-LDH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒 ，英文名： TIMP-1 ELISA Kit

Human factor related apoptosis inducing ligand (FASL) ELISA Kit 人凋亡相關(guān)因子配體(FASL)ELISA試劑盒

MonkeyInsulin,INSELISAKit 猴(INS)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforbFGF-9ELISAKit大鼠堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子9規(guī)格：48T/96T

細(xì)菌乳酸脫氫酶(LDH)總活性酶動(dòng)力比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

rabbitIerleukin4,IL-4ELISAKit兔子白介素4(IL-4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
大鼠肝細(xì)胞，BRL-3A細(xì)胞說(shuō)明書小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human epithelial specific aigen (ESA) ELISA Kit 人上皮特異性抗原(ESA)ELISA試劑盒

Humanlymphotoxinα,LTAELISAKit 人淋巴毒素α(LTA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanai-golgiapparatusaibody,AGAAELISA試劑盒人抗高爾基體抗體(AGAA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物亮氨酸(leucine)含量高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒20次

HumanVisceraladipose-specificserineproteaseinhibitor,vaspinELISAKit人內(nèi)臟脂肪特異性絲氨酸蛋白酶抑制劑(vaspin)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
大鼠肝細(xì)胞，BRL-3A細(xì)胞說(shuō)明書細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題，不予以重發(fā)的情況有哪些？
（1）客戶造成細(xì)胞污染，不重發(fā)；
（2）客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
（3）非推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
（4）細(xì)胞狀態(tài)不好，未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā)；
（5）細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的，不重發(fā)；
（6）細(xì)胞收到2天內(nèi)，未告知，不重發(fā)；
（7）視具體情況而定。