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剛果錐蟲探針法熒光定量PCR試劑盒檢測樣品RNA的抽提

發(fā)表時間:2023-03-15
剛果錐蟲探針法熒光定量PCR試劑盒檢測樣品RNA的抽提:

①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。

②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的氯仿,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚氯仿相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。

③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。

④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。

⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。

 育亨賓 英文名稱: Yohimbine CAS號: 146-48-5 分子式: 354.45 分子量: C21H26N2O3
 羅通定 英文名稱: Luo Tongding CAS號: 10097-84-4 分子式: 355.427 分子量: C21H25NO4
 七葉皂苷鈉 英文名稱: Seven leaves saponins sodium CAS號: 20977-05-3 分子式: 分子量:
 人參皂苷Rg3 英文名稱: Ginsenoside Rg3 CAS號: 38243-03-7 分子式: 785.02 分子量: C42H72O13
 人參皂苷Rf11 英文名稱: Ginsenoside Rf11 CAS號: sdfsg 分子式: 分子量:
 匹莫林 英文名稱: Pi Molin CAS號: 2152-34-3 分子式: 176.17 分子量: C9H8N2O2
 多巴胺鹽酸鹽 英文名稱: Dopamine hydrochloride CAS號: 62-31-7 分子式: 189.64 分子量: C8H12ClNO2
 鹽酸多塞平 英文名稱: Doxepin hydrochloride CAS號: 1229-29-4 分子式: 315.84 分子量: C19H22ClNO
 鹽酸多沙普侖 英文名稱: Do Schaap Leon hydrochloride CAS號: 7081-53-0 分子式: 414.97 分子量: C24H31ClN2O2
 鹽酸苯海索 英文名稱: Trihexyphenidyl hydrochloride CAS號: 52-49-3 分子式: 224.6 分子量: C7H9ClO6
 鹽酸苯海拉明 英文名稱: Diphenhydramine hydrochloride CAS號: 147-24-0 分子式: 291.82 分子量: C17H22ClNO
 氫溴酸加蘭他敏 英文名稱: Galanthamine hydrobromide CAS號: 1953/4/4 分子式: 368.27 分子量: C17H22BrNO3
 馬來酸氯苯那敏 英文名稱: Maleic acid - - - - - - - - - - CAS號: 113-92-8 分子式: 390.86 分子量: C20H23ClN2O4


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