線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅰ/NADH輔酶Q還原酶生化試劑盒（微量法）操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測樣品含量，如樣品濃度過高時(shí)，應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1.        加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。
4.        每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。
6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

 假交替單胞菌
 鼠李糖乳桿菌
 雙歧雙歧桿菌
 粘質(zhì)沙雷氏菌
 噬糖鹽紅菌
 師崗鏈霉菌
 委內(nèi)瑞拉鏈霉菌
 枯草芽孢桿菌
 彎曲芽孢桿菌
 缺陷短波單胞菌
 副凝聚短狀桿菌
 氧化微桿菌
 硝基還原假單胞菌
 肺炎克雷伯氏菌
 成團(tuán)腸桿菌(成團(tuán)泛菌)
 乙酸鈣不動(dòng)桿菌
 成團(tuán)腸桿菌
 瓊氏不動(dòng)桿菌
 尿腸球菌
 銅綠假單胞菌
 阿爾萊特葡萄球菌
 地衣形芽孢桿菌
 米氏硫胺素芽孢桿菌
 溶酪葡萄球菌
 調(diào)料葡萄球菌
 法氏檸檬酸桿菌
 發(fā)酵乳桿菌
 抗輻射不動(dòng)桿菌
 巴氏葡萄球菌