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神經(jīng)突出相關(guān)蛋白Slitrk1抗體實(shí)驗(yàn)原理

發(fā)表時(shí)間:2022-03-24

神經(jīng)突出相關(guān)蛋白Slitrk1抗體實(shí)驗(yàn)原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞,通常需要補(bǔ)體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而,抗體可通過與病毒或毒素的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。 
(2)活補(bǔ)體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補(bǔ)體。 
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的免疫球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,參與免疫應(yīng)答。 
(4)可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動
免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。 
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。 
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
抗體的生物素化標(biāo)記實(shí)驗(yàn)要點(diǎn):
1.如在反應(yīng)混合液中有疊氮鈉或游離氨基存在,會抑制標(biāo)記反應(yīng)。因此,蛋白質(zhì)在反應(yīng)前要對 0.1mol/L碳酸氫鈉緩沖液或0.5mol/L硼酸緩沖液充分透析;
2.所用的NHSB及待生物素化蛋白質(zhì)之間的分子比按蛋白質(zhì)表面的ε-氨基的密度會有所不同,選擇不當(dāng)則影響標(biāo)記的效率,應(yīng)先用幾個(gè)不同的分子比來篩選最適條件;
3.用NHSB量過量也是不利的,抗原的結(jié)合位點(diǎn)可能因此被封閉,導(dǎo)致抗體失活;
4.由于抗體的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此時(shí)可加入去污劑如 Triton x-100, Tween20等;
5.當(dāng)游離ε-氨基(賴氨酸殘基的氨基)存在于抗體的抗原結(jié)合位點(diǎn)時(shí),或位于酶的催化位點(diǎn)時(shí),生物素化會降低或損傷抗體蛋白的結(jié)合力或活性;
6.生物素還可能與不同的功能基團(tuán),如羰基、氨基、巰基、異咪唑基及苯酚基,也可與糖基共價(jià)結(jié)合;
7.交聯(lián)反應(yīng)后,應(yīng)充分透析,否則,殘余的生物素會對生物素化抗體與親和素的結(jié)合產(chǎn)生競爭作用;

8.在細(xì)胞的熒光標(biāo)記實(shí)驗(yàn)中,中和親和素的本底低,但由于鏈霉親和素含有少量正電荷,故對某些細(xì)胞可導(dǎo)致高本底。

ALDH16A1 乙醛脫氫酶16家庭A1抗體
AMIGO3 粘附分子IgG樣結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體
AKR1A1 乙醇脫氫酶1抗體
ALAD δ氨基乙酰丙酸脫水酶抗體
ALS2CR4 肌萎縮側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白4抗體
alpha 2 Macroglobulin α2巨球蛋白(α-2M)抗體
ACCSL ACCSL蛋白抗體
AFP 甲胎蛋白抗體
Mint3 β淀粉樣前體蛋白結(jié)合蛋白3抗體
ASTN2 星形肌動蛋白抗體
TREX1 系統(tǒng)性紅斑狼瘡相關(guān)蛋白TREX1抗體
phospho-ATRIP (Ser68+Ser72) 磷酸化系統(tǒng)性紅斑狼瘡先關(guān)蛋白TREX1抗體
Phospho-ATRIP (Ser224) 磷酸化系統(tǒng)性紅斑狼瘡相關(guān)蛋白TREX1抗體
AP2M1 接頭相關(guān)蛋白復(fù)合體AP-2μ鏈1抗體
Phospho-AP2M1 (Thr156) 磷酸化接頭相關(guān)蛋白復(fù)合體AP-2μ鏈1抗體
Annexin A7 膜粘連蛋白7抗體
C3orf15 3號染色體開放閱讀框15抗體
APOB48R 載脂蛋白B受體抗體
ABCA2 三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體
ApoB  載脂蛋白B抗體
ALOX15B 花生四烯酸15脂氧合酶2抗體
APOC4 載脂蛋白C4抗體
ARH 低密度脂蛋白受體銜接蛋白抗體
AUP1 原始廣泛存在蛋白1抗體
ANKRD37 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白37抗體
A4GALT α1,4-半乳糖基轉(zhuǎn)移酶1
AGTRAP 血管緊張素Ⅱ受體相關(guān)蛋白抗體
AX2R 膜粘連蛋白2受體抗體
ACEI 血管緊張素1轉(zhuǎn)換酶抑制劑抗體


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