SOX5試劑盒標(biāo)本激活方法:

1. 將450ul 標(biāo)本稀釋液加入到一支 1.5ml 進(jìn)口聚丙烯管中 , 再加 10ul 血清或血漿標(biāo)本。

2. 加20ul 1 N HC I ,蓋緊，上下混勻。 2 － 8 ℃ 放置60± 2 分鐘。

3. 加20ul 1 N NaOH, 蓋緊，上下混勻。

4. 即用，或放-20/-70 ℃ 保存3 天。計(jì)算結(jié)果時(shí)乘 以稀釋倍數(shù) 50 。 （ 注意：不同的標(biāo)本E2F1 的水平可能有較大差異，請根據(jù)實(shí)際情況靈活掌握稀釋度）

5. 細(xì)胞培養(yǎng)上清或組織勻漿 10 倍稀釋 (410ul 的標(biāo)本稀釋液＋ 50ul 樣本＋ 20ul 的 1N HCI+20ul 的 1N NaOH) 。
結(jié)果計(jì)算與判斷

1. 所有 OD 值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。

2. 以標(biāo)準(zhǔn)品20 00 、100 0 、500 、 250 、 125 、 62.5 、 31.2 、 0 pg /ml 為橫坐標(biāo)， OD 值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上作圖，畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。

3. 根據(jù)樣品 OD 值在該曲線圖上查出相應(yīng) E2F1 含量 ，再乘上稀釋倍數(shù)即可 。

試劑盒性能

1. 靈敏度 ： 最小的E2F1 檢測濃度小于 15 pg/ml。

2. 特異性： 可同時(shí)檢測重組或天然的人 E2F1 。 不與 人其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。

3. 重復(fù)性：板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于8.9％。
小鼠B淋巴細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞；SH3
倉鼠/小鼠雜交瘤細(xì)胞；145-2C11
小鼠黑色素瘤細(xì)胞；B16
小鼠T淋巴細(xì)胞；Cl.Ly1+2-/9
小鼠單核巨噬細(xì)胞；J774A.1
小鼠腎集合管細(xì)胞(SV40轉(zhuǎn)化)；M-1
綠色熒光蛋白標(biāo)記小鼠前胃癌細(xì)胞；MFC-GFP
小鼠腎足細(xì)胞；Mouse podocyte
小鼠淋巴瘤細(xì)胞；P388D1(IL-1)
小鼠子宮頸癌細(xì)胞；U14
綠色熒光蛋白標(biāo)記小鼠子宮頸癌細(xì)胞；U14-GFP
小鼠漿細(xì)胞瘤；MPC-11
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞；PA317
轉(zhuǎn)PYTL基因小鼠睪丸支持細(xì)胞；15P-1
BALB/C小鼠肝上皮細(xì)胞；BNL 1ME A.7R.1
小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞；CT26.WT [CT26WT]
小鼠睪丸畸胎瘤細(xì)胞；F9
小鼠網(wǎng)織細(xì)胞肉瘤；M5076
小鼠正常肝細(xì)胞；NCTC 1469 [NCTC1469]
小鼠神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞；Neuro-2a [N2a; Neuro-2a]
正常小鼠睪丸Leydig細(xì)胞；TM3
正常小鼠睪丸Sertoli細(xì)胞；TM4
615小鼠乳腺癌瘤株；Ca759
615小鼠乳腺癌瘤株；Ca761
615小鼠乳腺癌瘤株；Ca763
615小鼠T細(xì)胞性白血病瘤株；L7712
615小鼠T細(xì)胞性白血病瘤株；L7912
615小鼠肺癌瘤株；HP615
615小鼠滑膜肉瘤瘤株；ZM755
615小鼠乳頭狀肺腺癌瘤株；P615
小鼠肝癌瘤株；H22
615小鼠前胃癌瘤株；Fc
KM小鼠子宮頸癌瘤株；U14
KM小鼠子宮頸癌瘤株；U27
KM小鼠網(wǎng)織細(xì)胞肉瘤瘤株；LⅡ