在實(shí)驗(yàn)開始前,將試劑盒先從冰箱中拿出來,在室溫下放置20分鐘以上后,再 進(jìn)行測定,證試劑盒溫度要和室溫一致。如果把試劑盒從冰箱拿出來直接做實(shí)驗(yàn)會(huì)造成一些弱陽性標(biāo)本的檢測出現(xiàn)假陰性。因?yàn)樵诤竺娴姆跤磻?yīng)步驟中,造成孵育時(shí)間不夠。其次,ELISA實(shí)驗(yàn)中洗板用的洗液需每日更換配制,稀釋時(shí)所用的蒸餾水或去離子水應(yīng)保證質(zhì)量。
用于baiELISA測定的臨床標(biāo)本du最為常用zhi的是血清(漿)。本實(shí)驗(yàn)室用ELISA測定乙肝兩對半,甲肝,戊肝,抗HIV的標(biāo)本時(shí),在處理和保存方面要考慮以下幾個(gè)方面: 1) 要注意避免出現(xiàn)嚴(yán)重溶血及血清中混有紅細(xì)胞。當(dāng)標(biāo)本出現(xiàn)嚴(yán)重溶血及血清中混有紅細(xì)胞時(shí),反應(yīng)孔不易洗凈,殘留在反應(yīng)孔內(nèi)的血紅蛋白具有過氧化物酶的活性,顯色時(shí)可能造成假陽性。 2) 標(biāo)本凝固不全強(qiáng)行離心,造成血清中含有少量的纖維蛋白原,在實(shí)驗(yàn)過程中形成纖維蛋白吸附在反應(yīng)孔孔壁上不易洗掉,易造成假性結(jié)果。 3) 血清標(biāo)本可在2~8℃下保存1周。如血清樣本需長時(shí)間保存,則需放入-20℃冰柜內(nèi)冰凍保存。冰凍保存的血清標(biāo)本須注意避免反復(fù)凍融,標(biāo)本可能引起假陰性結(jié)果。此外凍融標(biāo)本的混勻不要進(jìn)行劇烈振蕩,應(yīng)反復(fù)顛倒混勻。