免疫途徑應(yīng)是多種多樣的，如靜脈、腹腔、肌肉、皮內(nèi)、皮下和淋巴結(jié)等，但肌肉和皮內(nèi)兩種途徑較少應(yīng)用。目前一般傾向于小劑量、多點(diǎn)、多途徑的方法，但具體應(yīng)視抗原的生物學(xué)特性和理化特性來決定。酶、毒素等生物活性抗原，一般不宜采用靜脈注射。球蛋白抗原免疫可選用皮下、皮內(nèi)和肌肉注射。但效價(jià)不高，因此大都選用抗原加弗氏佐劑、足掌皮下注射的方法，或者注卡介苗使腘淋巴結(jié)腫脹，然后直接注入腘淋巴結(jié)內(nèi)的方法，增強(qiáng)抗體的產(chǎn)生。

      足掌注射為近年來常用的免疫途徑，能獲得相當(dāng)良好的效果，但劑量不宜過大，一般家兔0.2～0.5mL，否則腫脹嚴(yán)重。有的采用先經(jīng)足掌內(nèi)注射卡介苗（后足掌各注 0.2～0.5mL）。10～14d后，腘淋巴結(jié)腫大，然后向淋巴結(jié)內(nèi)注射加有完全佐劑的抗原，兩側(cè)各0.5mL左右，半個(gè)月后再注射不加佐劑的抗原（3mg/mL）皮下或肌肉多點(diǎn)注射，每點(diǎn)0.1mL，總量0.5mL左右、這樣免疫效果較為理想。

注射次數(shù)可分為一次注射和多次注射兩種。一次注射，抗體產(chǎn)生的慢，效價(jià)低，但特異性高，如果再次注射，抗體產(chǎn)生的快，效價(jià)高，持續(xù)時(shí)間也較久。多次注射，可得高效價(jià)血清，但往往特異性較差．多次免疫的間隔時(shí)間，可因抗原性質(zhì)不同而異。